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如何远离外泌体研究烦恼(内附解决方案)


2013年,诺贝尔生理学或医学奖授予了三位在细胞间囊泡运输的调控机制领域做出突出贡献的科学家,自此开启了外泌体研究的新时代。

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▲ 图1. PubMed外泌体相关文章统计(数据来源PubMed官网)

图2. 国自然外泌体课题中标数量.jpg

▲ 图2. 国自然外泌体课题中标数量




外泌体为什么这么火?



01

来源



外泌体是细胞在生理或是病理状态下分泌的直径约为30  – 150nm的被双层脂质膜包裹的细胞外囊泡,是由细胞中的多泡体(Multivesicular body,  MVB)和细胞膜融合释放其内部的管腔内泡(Intraluminal vesicles,  ILVs)到细胞外形成的。每种细胞都会产生独特的外泌体,具有独特的特性和内容物。

图3. 外泌体横截面模式图,内部为hsp70蛋白(来源Wikipedia).jpg

▲ 图3. 外泌体横截面模式图,内部为hsp70蛋白(来源Wikipedia


02

能力


外泌体中包含其起源细胞的各种分子成分,比如蛋白质,RNA和DNA,在细胞间物运输和信号交流中发挥着重要的作用,并且可以帮助细胞清理折叠错误的蛋白等细胞废物,帮助维持细胞内环境的稳态。

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▲ 图4. 外泌体功能和特征[1]

03

才华


外泌体因其是细胞天然产生的囊泡并具有一定的物质运输能力,作为天然的细胞通讯系统,在体液中广泛存在,因此在新的药物载体开发应用上,外泌体具有毒性低,无免疫原性和渗透性好等优势。另一方面,不同细胞产生的外泌体具有特异性,因此在疾病和肿瘤早筛中外泌体也有着巨大的潜力。




外泌体分离方法


目前外泌体的分离方法主要有以下几种:

提取方法

优点

缺点

超速离心法

分离外泌体纯度较高

操作繁琐,耗时长

过滤离心

简单、省时,不影响外泌体的生物活性

纯度不足

密度梯度离心法

纯度较高

前期准备工作繁杂

聚合物沉淀法

简单、无需特殊设备

周期长、易沉淀非外泌体污染物

凝胶排阻法

操作简单,分离外泌体纯度高

技术难度略高,易染菌

免疫纯化

保证外泌体形态的完整、特异性高、操作简单

生理性盐浓度会影响外泌体生物活性

色谱法

得到的外泌体大小均一

设备特殊,价格高,应用不广泛

微流控技术

产物纯度高,分离速度快

技术未成熟




精品推荐


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提取产物经过电镜分析,NTA粒径分析和WB实验三大外泌体金标准(国际细胞外囊泡学会(ISEV)提议,以电镜鉴定外泌体形态,以粒径分析(NTA)鉴定外泌体大小,以WB检测鉴定外泌体表面标志物)验证,满足您的实验需求。

提取产物经过电镜分析,NTA粒径分析和WB实验三大外泌体金标准.jpg


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货号

名称

规格

41201ES25/50

Hieff? Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media)

细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒

25/50 mL

41202ES30

Hieff? Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma)

血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒

30 mL

41204ES10/30new

Hieff? Quick exosome isolation kit(for Body Fluids)

体液外泌体快速抽提试剂盒

10/30 T

41203ES05

Exosome identification kit for Westernblot

外泌体鉴定试剂盒

5 T

52321ES05

GW 4869 (hydrochloride hydrate)外泌体抑制剂

2 mg





参考文献


【1】. Kalluri R, LeBleu VS. The biology, function, and biomedical applications of exosomes. Science. 2020 Feb 7;367(6478):eaau6977. doi: 10.1126/science.aau6977. PMID: 32029601; PMCID: PMC7717626.




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